狗IL-8(IL)

特异性:
该测试具有高灵敏度和特异性,可用于检测犬狼疮爱丽丝犬(犬)(犬爱丽丝犬)IL8。
观察到Canislupusfamiliaris(Canisfamiliaris)IL8anan类似物之间存在明显的交叉反应或干扰。
准确度:
批内准确性(一项测试的准确性):测试了3个已知浓度为8%CV%的样品,并在板上评估了两次。
试验间准确性(两次试验之间的准确性):在20个试验中分析了三个已知浓度为10%CV%的样品。
样品收集和储存:
血清:使用血清分离管(SST)在室温下于4°C过夜凝结样品2小时,然后以1000 xg离心15分钟。
立即口服消除人体并将样品存储在-20°C-80°C
避免反复冻融。
血浆:EDTA血浆或肝素抗凝剂的收集。
在1000 x gat2-8°C下离心15分钟,收集30分钟。
立即测试oraliquotand并在-20°Cor-80°C下采样。
避免反复冻融。
检测步骤:
使用前,将所有试剂和样品置于室温。
在开始测试之前,再次离心样品。
建议一式两份分析所有样品和标准品。
1)
准备上一节中指示的所有试剂,工作标准品和样品。
2)
再次查看测试设计表,确定要使用的孔的数量以及袋子中剩余的源和背衬粘合剂层,密封拉链并将未使用的孔存储在4°C下。
3)
加入100μl标准溶液和样品。
用附带的胶带覆盖。
在37°C下孵育2小时
分配板提供标准配准和分析样品。
4)
从每个孔中除去液体,请勿清洗。
5)
向每个孔中添加100μl生物素抗体(1x)。
用胶带覆盖。
在37°C下孵育1小时
(生物素抗体(1x)可能看起来不透明。
在室温下加热并混合直至溶液均匀。
)6。
吸出每种良好研磨的清洁溶液,并重复两次该过程,共进行3次清洗。
每次使用水瓶,多通道移液器,多分配器,洗衣机和支撑架,用洗涤缓冲液(200μl)彻底洗涤2分钟。。
最后一次洗涤后,通过抽吸或倾析除去所有残留的洗涤缓冲液。
将板和插槽倒在干净的纸巾上。
7)
向每个孔中添加100μlHRP-抗生物素蛋白(1x)。
用新的粘合剂覆盖微量滴定板。
在37°C下孵育1小时
8)
重复步骤5进行真空/清洁过程。
9)
向每个孔中添加90μlTMBS底物。
在37°C下孵育15-30分钟
避光
10)
向每个孔中添加50μlStopSolution,然后轻轻触摸板以确保其混合均匀。
11)
使用设置在450 nm的酶标仪在5分钟内确定每个孔的光密度。
如果可以进行波长校正,则设置为540 nm或570 nm。
从450 nm读数中减去540 nm或570 nm读数。
这种减法对于印版上的光学缺陷是正确的。
未经校正直接在450 nm处读取的读数较大且准确。
结果计算:
使用CurveExpert 1 Professional。
建议从网络上下载三个标准曲线。
显示并减去每个标准品重复测量的平均值和标准光密度的平均值。
通过使用可生成4参数逻辑曲线调整(PL)的计算机减少数据来创建标准曲线。
或者,通过绘制六边形轴上每个标准物之前的吸收介质或分离度相对于轴上的浓度来绘制标准曲线,并通过图中的点绘制最佳曲线近似值。
可以通过将IL8浓度记录映射到O记录来对数据进行分类。
D.
最佳拟合线可以通过回归分析确定。
此过程可确保准确和适当的数据拟合。
如果样品被稀释,则必须将标准曲线读取的浓度乘以溶液系数。


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